血液凝结酶是大部分病原菌株能造成的凝结酶，能使带有肝素等抗凝剂的人或兔血液产生凝结的酶类物质，发病株大部分能造成，是辨别葡萄球菌有没有高致病的关键指标值。
血液凝结酶相对分子质量为80449.3，等电点为8.82，耐温性强，100℃30Min依然维持特异性，可被胰蛋白酶毁坏。橙黄色葡萄球菌血液凝结酶有二种遍布：一种代谢至菌身体之外的，称之为分散凝结酶（free coagulase）；另一种存有于菌体植物细胞上，称之为融合凝结酶（bound coagulase）或汇集因素（chumping factor）[1]。血液凝结酶具备较强抗原性，漫性橙黄色葡萄球菌感染病人血液可以检验到很多血液凝结酶抗原的存有。血液凝结酶能被别人血液中的协作因素（cofactor）激话变为凝血酶类似物，从而催化反应可溶纤维蛋白原变成不可溶游离脂肪酸，进而使血液凝结。不可溶游离脂肪酸包囊在菌体表层，在其维护下菌体既能免遭血细胞中除菌物质的功效，也可以抵御巨噬细胞的吞幢。
橙黄色葡萄球菌造成的感染便于局限性化和产生静脉血栓，不常产生全身感染，这与凝结酶息息相关。血液凝结酶实验是分辨橙黄色葡萄球菌的发病力的关键方式，另外也是橙黄色葡萄球菌最重要的鉴别手段。
血液凝结酶的检验最常见的方式是兔血液凝结法，标准操作步骤以下：
用盐水将兔血细胞1:5稀释液，取化0.5 mL稀释液后的兔血细胞添加到试管婴儿中，加上0.3 mL待测液，试品和血细胞混和匀称置37℃恒温培养箱内，每间距30 min观查1次結果。该实验需要另外做己知试品的呈阳性、阴性对照。若6 h内试品管出現凝结，阳性对照管出現凝结，阴性对照管不凝结，才可分辨试品为呈阳性。
常见问题
1.每过30 min理应立即观查，由于一些菌种可造成葡萄球菌蛋白激酶，葡萄球菌蛋白激酶是一种溶化学纤维胰蛋白酶，可让己汇集的血液再次融解，如不立即观查便会造成假阴性結果。
2.应用的血液应是无菌检测血液，假如血液受溶血性真菌感染则会造成假阴性，假如血液受自然环境中的橙黄色葡萄球菌环境污染则会造成阳性。
3.不能在高盐培养液上挑取菌体立即开展血液凝结酶试验，由于盐能使血液自凝造成 阳性。
4.理应应用BHI新鮮塑造物，置放時间太长的塑造物内血液凝结酶促反应会减少造成 假阴性。