底物水准磷酸化（substratelevelphosphorylation）：物质在微生物空气氧化全过程中，常转化成一些带有高能键的化合物，而这种化合物可立即偶联ATP或GTP的生成，这类造成ATP等源能分子结构的方法称之为底物水准磷酸化。
底物水准磷酸化（substratelevelphosphorylation）：就是指物质在脱氢或脱水全过程中，造成源能类化合物并立即将源能类化合物中能量转移到ADP(GDP)转化成ATP(GTP)的全过程。
指在吸收代谢全过程中，底物因脱氢、脱水等功效而使动能在分子结构內部再次遍布，产生源能硫酸铵化合物，随后将源能磷酸基团迁移到ADP产生ATP的全过程。比如在糖的吸收代谢全过程
底物水准磷酸化
中，甘油醛-3-硫酸铵脱氢并磷酸化转化成甘油酸-1，3-二磷酸，在分子结构中产生一个源能磷酸基团，在酶的催化反应下，甘油酸-1，3-二磷酸可将源能磷酸基团转入ADP，转化成甘油酸-3-硫酸铵与ATP。
又如甘油酸-2-硫酸铵脱水转化成烯醇丙酮酸硫酸铵时，也可以在分子结构內部产生一个源能磷酸基团，随后再迁移到ADP转化成ATP。
又如在三羧酸循环中，琥铂酰CoA（辅酶A）转化成琥珀酸，另外伴随GTP的转化成，也是底物水准磷酸化。
底物水准磷酸化特性
底物水准磷酸化指源能化合物的放能水解作用或与酯基迁移相偶联的ATP合成作用。不包括光合磷酸化或呼吸链中氧化磷酸化的ATP转化成全过程。比如：糖酵解途径中造成的源能硫酸铵化合物甘油酸-1，3-二磷酸和烯醇式硫酸铵丙酮酸在水解作用下，源能磷酸基团迁移到ADP分子结构上转化成ATP。又如三羧酸循环中造成的源能硫酯化合物琥铂酰辅酶A在水解作用下水解反应成琥珀酸，另外使GDP磷酸化为GTP，GTP再与ADP功效转化成ATP。这种全是底物水准磷酸化的案例。底物水准磷酸化沒有相互的作用机制。